高尔基体（Golgi apparatus, Golgi bodies）是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的 细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体；高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有 极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称 为形成面（forming face）或顺面（cis face）。
高尔基体提取试剂盒 常备现货

诺博莱德 高尔基体提取试剂盒

高尔基体提取试剂盒 常备现货

产品货号：P4934

产品名称：高尔基体提取试剂盒

产品规格：50T/100T

产品简介：

中文名称：高尔基体提取试剂盒

规格：50T ; 100T

储存条件：2-8℃，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder P4934 高尔基体提取试剂盒

适用样本：动物细胞/组织

产品介绍

高尔基体（Golgi apparatus, Golgi bodies）是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体；高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有 极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称 为形成面（forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面（mature face）或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡，在具有极性的细胞 中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。因其看上极像滑面内质网，因此有科学家认 为它是由滑面内质网进化而来的。

高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、 甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进 行加工、对比分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。

本试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的高尔基体提取。

注：

1. 提取液长期不用时置于-20℃保存，15 天内多次使用的话置于 4℃保存即可。

2. 试剂拆封后请尽快用完。

需自备试剂及设备

离心机、振荡器、匀浆机/匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒、1×PBS 缓冲液、离心管、吸头、一次性手套 、细胞筛

使用方法（仅供参考）：

一、使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3. 最好使用 Dounce 匀浆器匀浆，如果没有 Dounce 匀浆器，用普通 1ml 玻璃匀浆器匀浆也可，但是

高尔基体回收率可能会下降。

二、细胞高尔基体提取：

1. 取 1-2×10⁷个细胞，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

注：贴壁培养细胞用yi酶消化下来或者用刮刀刮取均可。

2. 用冷 PBS 洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

注：用 1000×g 力离心 5 分钟。

3. 加入 500μl 冷的试剂 A 重悬细胞，置冰上 10 分钟。

4. 用 Dounce 匀浆器充分匀浆几分钟。

注：先用 Doumce 匀浆器的松型槌初步匀浆 20-30 次，再用紧型槌匀浆 20-30 次。

每上下一个来回为一次。

5. 将匀浆液在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

7. 将上清在 4℃，3000×g 条件下离心 10 分钟。

8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

9. 将上清在 4℃，5000×g 条件下离心 10 分钟。

10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

11. 在上清中加入 10μl 试剂 WT。

12. 在 4℃，20000×g 条件下离心 20 分钟。弃上清，留沉淀。

注：沉淀是离心管底部薄薄一层。不是明显团块。

13. 在沉淀中加入 500μl 冷的试剂 B，轻轻混匀。

14. 在 4℃，20000×g 条件下离心 30 分钟。

15. 弃上清，沉淀用高尔基体保存液重悬。

注：也可不用试剂盒中的高尔基体保存液重悬。

根据实验需要选择合适的缓冲液重悬高尔基体或直接用于下游实验。

沉淀是离心管底部薄薄一层。不是明显团块。

16. 即得到高尔基体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

三、组织高尔基体提取：

1. 取 50 mg -100 mg 新鲜动物组织样本，用 PBS 洗涤干净。

2. 用手shu剪刀尽可能剪碎，用冷 PBS 洗涤两次。

注：用 1000×g 力离心 5 分钟。

3. 加入 500μl 冷的试剂 A，置冰上 10 分钟。

4. 用 Dounce 匀浆器充分匀浆几分钟。

注：先用 Doumce 匀浆器的松型槌初步匀浆 20-30 次，再用紧型槌匀浆 20-30 次。

每上下一个来回为一次。

5. 将匀浆液在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

7. 将上清在 4℃，3000×g 条件下离心 10 分钟。

8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

9. 将上清在 4℃，5000×g 条件下离心 10 分钟。

10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。

11. 在上清中加入 10μl 试剂 WT。

12. 在 4℃，20000×g 条件下离心 20 分钟。弃上清，留沉淀。

注：沉淀是离心管底部薄薄一层。不是明显团块。

13. 在沉淀中加入 500μl 冷的试剂 B，轻轻混匀。

14. 在 4℃，20000×g 条件下离心 30 分钟。

15. 弃上清，沉淀用高尔基体保存液重悬。

注：也可不用试剂盒中的高尔基体保存液重悬。

根据实验需要选择合适的缓冲液重悬高尔基体或直接用于下游实验。

沉淀是离心管底部薄薄一层。不是明显团块。

16. 即得到高尔基体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得优良实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并che底清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

高尔基体提取试剂盒 常备现货

产品订购信息：

P4934  高尔基体提取试剂盒  50T/100T